溶血与凝聚检查法是生物医学、制药及医疗器械领域中重要的质量控制手段，主要用于评估样品（如注射液、生物制品、医疗器械浸提液等）对红细胞的破坏能力及其引发血液异常反应的风险。溶血指红细胞破裂导致血红蛋白释放的现象，而凝聚则表现为红细胞异常聚集。这两种反应可能引发血栓、炎症或免疫反应，因此相关检测在药物安全性评价、医疗器械生物相容性测试及血液制品质量控制中具有关键意义。
该检测的核心目标是量化样品对红细胞的损伤程度，并验证其是否符合临床应用的安全标准。随着生物医药行业的快速发展，国际监管机构（如FDA、ICH）及中国药典均对溶血与凝聚检测提出了明确要求，确保产品在上市前具备可靠的安全性数据支撑。
溶血与凝聚检查法主要包含以下检测项目：
1. 溶血率测定：通过测定样品与红细胞孵育后释放的血红蛋白浓度，计算溶血百分比，直接反映样品对红细胞的破坏能力。
2. 凝聚反应观察：采用显微镜或流式细胞术检测红细胞是否存在异常聚集，评估样品对细胞表面电荷或膜结构的影响。
3. 渗透压影响分析：验证样品渗透压是否与血液等渗，避免因渗透压失衡引发红细胞变形或破裂。
4. 时间依赖性测试：监测不同接触时间下溶血与凝聚的动态变化，确定安全暴露阈值。
目前主流的检测方法包括：
1. 分光光度法：利用血红蛋白在540nm处的特征吸收峰，通过比色法量化溶血程度。该方法操作简便、灵敏度高，适用于大批量样品筛查。
2. 显微镜直接计数法：通过血细胞计数板或染色观察，精确统计破裂红细胞比例及凝聚形态。此方法可直观反映细胞损伤特征，但需经验丰富的技术人员操作。
3. 流式细胞术：采用荧光标记技术区分完整红细胞与溶血碎片，同时分析细胞膜完整性及表面标志物变化，适用于高精度研究场景。
4. 体外动态模型：结合微流控芯片模拟血液流动环境，评估样品在生理剪切力下的溶血效应，更贴近实际应用条件。
国内外主要依据以下标准开展检测：
1. 国际标准：ISO 10993-4（医疗器械溶血试验）、ICH S7B（药物非临床安全性评价）对实验设计、阳性对照设置及结果判定提出具体要求。
2. 中国标准：《中国药典》1141通则规定，注射剂溶血率需≤5%；YY/T 0615.1-2022明确了医疗器械浸提液的检测流程。
3. 判定阈值：通常将溶血率≤5%判定为合格，凝聚反应应无可见团块形成。特殊产品（如血液接触类器械）需执行更严格的标准。
4. 质量控制：要求实验全程使用新鲜抗凝血（采集后4小时内）、设置生理盐水阴性对照及蒸馏水阳性对照，确保数据可靠性。
